弗雷德里克斯堡假单胞菌及其在防病中应用
本发明涉及微生物农药，酒店保洁13825404095具体涉及一株弗雷德里克斯堡假单胞菌及其在防病中应用。
背景技术：
1、假单胞菌属(pseudomonas spp.)细菌是典型的根际促生细菌，适生范围广。以荧光假单胞菌(p.fluorescens)为代表的一些生防菌株可产生多种抑菌活性物质，大量产生抗生素是假单胞生防菌的一个重要特点，因此，不少假单胞菌已被商业化用于植物防病。目前，假单胞菌多用于防治根茎病害以及植物促生，已有学者用假单胞菌成功防治了番茄、辣椒、黄瓜、甜瓜等多种植物的侵染性病害。
2、目前，微生物挥发性物质在抑菌方面的研究已成为研究热点，黄伟等研究了芽孢杆菌挥发性成分研究和防治机理，利用解淀粉芽孢杆菌t-5产生的挥发性物质有效抑制对番茄青枯病病菌的生长。蒙利玄等分离得到一株对致病疫霉具有枯抗活性的假单胞菌菌株x48，其挥发性物质抑制了马铃薯致病疫霉生长。
3、然而，关于弗雷德里克斯堡假单胞菌在生物防治上的研究未有报道。因此迫切需要挖掘更多高效稳定的生防菌剂，以符合农业可持续发展的需求。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题是如何抑制果蔬作物如番茄、辣椒、黄瓜、甜瓜等多种植物的侵染性病害。
2、为解决上述技术问题，本发明首先提供了一株弗雷德里克斯堡假单胞菌。
3、本发明提供的弗雷德里克斯堡假单胞菌为弗雷德里克斯堡假单胞菌(pseudomonas frederiksbergensis)，其菌株号为zf503，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no.24583。
4、本发明提供了一种菌剂，所述菌剂含有上述弗雷德里克斯堡假单胞菌和/或所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的代谢物；所述菌剂可为病原菌抑制剂或病害抑制剂。
5、所述病原菌可为灰葡萄孢菌(botrytis cinerea)、立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)、甜瓜尖孢镰刀菌专化型(fusarium oxysporumf.sp.melonis)、茄病镰孢菌(fusariumsolani)、辣椒疫霉菌(phytophthora capsici leonian)、野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(xanthomonas campestris pv.campestris)、丁香假单胞番茄致病变种(pseudomonas syringae pv.tomato)、密执安棒杆菌密执安亚种(clavibactermichiganensis subsp.michiganensis)、青枯劳尔氏菌(ralstonia solanacearum)和/或西瓜噬酸菌(acidovorax citrulli)。
6、所述病害可为甜瓜枯萎病、黄瓜根腐病、辣椒疫霉病和番茄青枯病。
7、上述菌剂的活性成分可为上述弗雷德里克斯堡假单胞菌和/或上述弗雷德里克斯堡假单胞菌的代谢物，上述菌剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述菌剂的其他活性成分本领域技术人员可根据对病害的抑制效果确定。
8、上述菌剂中，除所述活性成分外，还含有载体。所述载体可为农药领域常用的且在生物学上是惰性的载体。所述载体可为固体载体或液体载体；所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。
9、上述菌剂可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
10、根据需要，上述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、ph调节剂等。
11、上文中，所述代谢物可从所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的发酵液中获得。所述代谢物可为所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的无菌代谢物或所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的含菌代谢物。所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的无菌代谢物(无菌发酵滤液)具体可按照如下方法制备，在液体培养基中培养所述弗雷德里克斯堡假单胞菌，过滤除去液体培养物(发酵液)中的所述弗雷德里克斯堡假单胞菌即得到所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的无菌代谢物。所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的含菌代谢物具体可按照如下方法制备，在液体发酵培养基中培养所述弗雷德里克斯堡假单胞菌，收集发酵液，该发酵液即为所述弗雷德里克斯堡假单胞菌的含菌代谢物。
12、本发明还提供了上述弗雷德里克斯堡假单胞菌在制备下述任一的产品中的应用：
13、1)用于防治植物病害的菌剂，所述病害为甜瓜枯萎病、黄瓜根腐病、辣椒疫霉病和番茄青枯病；
14、2)病原菌抑制剂。
15、所述病原菌可为灰葡萄孢菌(botrytis cinerea)、立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)、甜瓜尖孢镰刀菌专化型(fusarium oxysporumf.sp.melonis)、茄病镰孢菌(fusariumsolani)、辣椒疫霉菌(phytophthora capsici leonian)、野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(xanthomonas campestris pv.campestris)、丁香假单胞番茄致病变种(pseudomonas syringae pv.tomato)、密执安棒杆菌密执安亚种(clavibactermichiganensis subsp.michiganensis)、青枯劳尔氏菌(ralstonia solanacearum)和/或西瓜噬酸菌(acidovorax citrulli)。
16、本发明还提供了一种生物有机肥。
17、所述生物有机肥含有所述弗雷德里克斯堡假单胞菌或所述的菌剂。
18、培养上述弗雷德里克斯堡假单胞菌的方法也属于本发明的保护范围。
19、上述方法包括将所述弗雷德里克斯堡假单胞菌在用于培养假单胞菌的培养基中培养的步骤。
20、本发明还提供了所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将所述的弗雷德里克斯堡假单胞菌作为活性成分，得到所述菌剂。
21、本发明还提供了上述弗雷德里克斯堡假单胞菌或其菌剂在作为生防菌剂中的应用。
22、本发明还提供了上述弗雷德里克斯堡假单胞菌或其菌剂在作为或制备产生挥发性抑菌剂中的应用。
23、所述挥发性抑菌剂可为病原真菌抑制剂。
24、所述病原真菌为立枯丝核菌和/或灰葡萄孢。
25、上述弗雷德/里克斯堡假单胞菌在防治植物病害的应用，所述病害可为如下任一种：
26、1)甜瓜枯萎病；
27、2)黄瓜根腐病；
28、3)疫霉根腐病；
29、4)番茄青枯病。
30、上述应用中，所述植物为甜瓜、黄瓜、辣椒或番茄。
31、所述甜瓜枯萎病可为由甜瓜尖孢镰刀菌专化型(fusariumoxysporumf.sp.melonis)引起的病害、黄瓜根腐病可为由茄病镰孢菌(fusarium solani)引起的病害、辣椒疫霉病可为由辣椒疫霉菌(phytophthora capsici leonian)和番茄青枯病可为由青枯劳尔氏菌(ralstonia solanacearum)引起的病害。
32、所述应用中，所述弗雷德里克斯堡假单胞菌可通过灌根的方式施用。
33、本研究采用稀释涂布法，从番茄根际土壤中分离筛选到一株对多种病原细菌具有显著抑制效果的生防菌株zf503。经过形态学特征观察、biolog测定和多基因系统发育树分析，鉴定其为弗雷德里克斯堡假单胞菌(pseudomonas frederiksbergensis)。
34、同时测定了该菌株产蛋白酶能力、溶磷能力、嗜铁能力、挥发性物质抑菌活性及在活体盆栽条件下对甜瓜枯萎病、黄瓜根腐病、辣椒疫霉病、番茄青枯病的防治效果。生防机理初步研究发现，菌株zf503在代谢过程中可产生蛋白酶，且具有溶磷、嗜铁能力，同时对多个细菌均有拮抗作用，能够有效抑制5种病原细菌的生长。采用二分皿法测定其挥发性物质对2种病原真菌均有抑制效果。活体盆栽条件下，接种菌株zf503的甜瓜、黄瓜、辣椒和番茄发病率和病情指数均显著降低，活体盆栽防效可达40％。综上所述，菌株zf503具有良好的生防潜力和应用前景。